Бромфеноловий синій

Бромфеноловий синій (3',3",5',5"-тетрабромофенолсульфонфталеїн, БФС, альбутест[3]) натуральний барвник, що також застосовується в лабораторній практиці як pH-індикатор та маркер при проведенні електрофорезу.

Індикатор [ред. редагувати код ]

Може застосовуватись у діапазоні pH від 3.0 до 4.6. При pH нижче 3.0 розчин має жовтий колір, вище 4.6 - пурпуровий. [1]

Маркер [ред. | редагувати код ]

БФС зручно використовувати як свідок, тобто. для візуалізації зразків. При нейтральних та слаболужних значеннях pH молекули БФС заряджені негативно (pK~3.6), а сам розчин БФС яскравого фіолетового кольору. Відповідно, під час проведення електрофорезу БФС переміщається від катода (-) до анода (+), тобто у тому напрямі, як і нуклеїнові кислоти (ДНК чи РНК). Те саме відбувається при електрофорезі білка, якщо використовується метод Леммлі (Laemmli). Під час проведення електрофорезу ДНК (РНК) рухливість БФС залежить від цього, який концентрації використовують гель. Наприклад, в 1% агарозному гелі БФС мігрує приблизно так само, як і фрагмент ДНК розміром 300 н.п., а в 2% агарозі - як 150 н.п. фрагмент.

Матковий розчин БФС для проведення електрофорезу ДНК в агарозному гелі (6x*) можна приготувати за таким прописом: сахароза - 4 г. (або гліцерин 2,5 мл) БФС – 25 мг. TRIS-acetate-EDTA (50x) – 200 мкл. вода до 10мл.

• Відповідно, на кожні 5 мкл зразка беруть 1 мкл маточного розчину БФС (1:5).

Див. також [ред. редагувати код ]

Примітки [ред. редагувати код ]

Бромфеноловий синій: характеристики, приготування, застосування, токсичність

У бромфеноловий синій Це хімічна речовина органічної природи, яка завдяки своїй здатності перетворюватися за певних значень pH використовується для титрування хімічних речовин. Тобто він є корисним як індикатор pH.

Він також відноситься до трифенілметанових барвників. Сполуки трифенілметану та їх похідні зазвичай використовуються як барвники у харчовій, фармацевтичній, текстильній та поліграфічній промисловості.

Цей індикатор pH має жовтий колір при pH ≤ 3 та фіолетово-фіолетовий при pH ≥ 4,6. Отже інтервал візуального переходу становить від 3 до 4,6.

Ця речовина також відома як тетрабромфеноловий синій, але його наукова назва – 3,3,5,5 – тетрабромфенол сульфонфталеїн; та його хімічна формула, C₁₉ГОДИНА₁₀Br₄АБО₅З.

Індикатор pH бромфеноловий синій має низьку токсичність для шкіри та слизових оболонок, а також було доведено, що він не має мутагенних властивостей. В даний час він використовується в методах поділу білків методом електрофорезу в поліакриламідному гелі та двовимірному електрофорезі.

Це стає гарним забарвленням для використання in vivo у терапевтичних операціях з видалення склоподібного тіла та інших кристалічних структур ока у людини. Цей метод полегшить візуалізацію цих структур під час операції, гарантуючи їхнє правильне вилучення.

характеристики

Бромфеноловий синій являє собою кристалічний порошок коричнево-жовтогарячого або червонувато-фіолетового кольору. Він має температуру кипіння 279 ° C, а його молекулярна маса становить 669,96 моль/л. Температура плавлення становить 270–273°C.

Підготовка

Зазвичай цей індикатор pH використовується при концентрації 0,1% з використанням 20% етилового спирту як розчинник, оскільки він слабо розчинний у воді.

Однак є й інші речовини, які служать як розчинники, такі як оцтова кислота, метиловий спирт, бензол і деякі лужні розчини.

Для техніки електрофорезу використовують у концентрації (0,001%).

Використати

Індикатор PH

Це один із найчастіше використовуваних індикаторів pH у хімічних лабораторіях для кислотно-основного титрування.

Пляма в техніці електрофорезу

Бромтимоловий синій використовується як 0,001% барвника при розділенні білків методом електрофорезу в поліакриламідному гелі (SDS-PAGE). Ця методологія корисна для контролю додавання різної білкової сировини деякі оброблені харчові продукти, такі як ковбаси.

Бромфеноловий синій 0,05% також використовується у методиці двовимірного електрофорезу.

Ця корисність можлива завдяки тому факту, що барвник бромфеноловий синій має заряд і легко переміщається в гелі, залишаючи на своєму шляху чітко видимий синьо-фіолетовий колір. Крім того, він переміщається набагато швидше, ніж білки та молекули ДНК.

Таким чином, бромфеноловий синій чудово підходить для позначення передового фронту, дозволяючи зупинити електрофорез у потрібний час, без ризику того, що молекули, виявлені в пробі, вийдуть із гелю.

Токсичність

Пряма контактна токсичність

У цьому сенсі NFPA (Національна асоціація протипожежного захисту) класифікує цю речовину як небезпечну для здоров'я (1), займистість (0) та реактивність (0). Це означає, що він є низьким ризиком для здоров'я, і ​​насправді він відсутній в останніх двох відносинах.

Злегка дратує шкіру. У разі прямого контакту рекомендується негайно зняти забруднений одяг та промити великою кількістю води. При попаданні на слизові оболонки негайно промити, якщо потерпілий носить контактні лінзи, слід негайно зняти і звернутися за медичною допомогою.

У разі вдихання слід надати першу допомогу, наприклад, штучне дихання та негайну медичну допомогу.

При випадковому ковтанні слід викликати блювання і ввести 200 мл води. Згодом постраждалого необхідно доставити до найближчого медичного центру.

Дослідження генотоксичності

Дослідження генетичної токсичності бромфенолового синього проводилися з використанням різних методологій, таких як метод Ames Salmonella/мікросом, аналіз лімфоми мишей L5178Y TK+/-, аналіз мікроядер миші та мітотична рекомбінація зі штамом D5 Saccharomyces cerevisiae дріжджі.

Проведені дослідження показали, що бромфеноловий синій не має генотоксичної дії. Тобто випробування визначили, що не було генетичної мутації, хромосомних аберацій та первинного пошкодження ДНК.

Дослідження генотоксичності було необхідно провести, оскільки аналогічні зі структурної точки зору сполуки виявляли мутагенну дію. Однак тепер відомо, що такі ефекти пов'язані з наявністю мутагенних домішок, а не з самою сполукою.

Гістологічне дослідження токсичності

З іншого боку, Haritoglou та ін. Провели дослідження, у якому оцінили ефект нових життєво важливих барвників. in vivo короткостроково для внутрішньоочної хірургії. Серед випробуваних барвників був бромфеноловий синій. Барвник розчиняли у збалансованому сольовому розчині.

Дослідники виконали вітректомію (видалення склоподібного тіла ока) на 10 свинячих очах. in vivo. Згодом вони вводили барвник у порожнину та давали йому діяти протягом 1 хвилини, а потім промивали фізіологічним розчином. Вони також забруднили капсулу кришталика того ж ока. Надалі очі досліджували за допомогою світлової та електронної мікроскопії.

З усіх оцінюваних барвників бромфеноловий синій був тим, який мав найкращу відповідь, забарвлюючи на 2%, 1% та 0,2% і водночас не викликаючи гістологічних змін, які показали токсичність.

Таким чином, він стає найкращим кандидатом для використання у людей під час ретиновітреальних операцій, полегшуючи візуалізацію склоподібного тіла, епіретинальних мембран та внутрішньої обмежуючої мембрани.

Посилання

1. "Бромфеноловий синій".Вікіпедія, вільна енциклопедія. 9 травня 2019, 09:12 UTC. 24 травня 2019, 20:57: en.wikipedia.org.
2. Лопес Л., Греко Би., Ронейн П., Валенсія Е. Алан [Інтернет]. 2006 вересень [процитовано 24 травня 2019]; 56 (3): 282-287. Наявність: scielo.org.
3. Ечеверрі Н., Ортіс, Бланка Л. та Камінос Дж. (2010). Протеомний аналіз первинних культур щитовидної залози.Колумбійський журнал хімії, 39 (3), 343-358. Отримано 24 травня 2019 р. із сайту scielo.org.
4. Lin GH, Brusick DJ. Дослідження мутагенності двох трифенілметанових барвників, бромфенолового синього та тетрабромфенолового синього. J Appl Toxicol. 1992 Aug; 12 (4): 267-74.
5. Haritoglou C, Tadayoni R, May CA, Gass CA, Freyer W., Priglinger SG, Kampik A. Короткострокова оцінка in vivo нових життєво важливих барвників для внутрішньоочної хірургії. Сітківка. Липень-серпень 2006 р.; 26 (6): 673-8.